鎳Ni柱L00666是將Ni NTA金屬螯合層析介質(zhì)裝填于層析柱中的即用型親和層析柱，省去了自行裝填層析柱的麻煩和柱效不高的風(fēng)險(xiǎn)，介質(zhì)和層析柱的結(jié)合使層析變得高效簡(jiǎn)單。
金屬離子Ni2+預(yù)先螯合在以NTA為配基的瓊脂糖凝膠上，具有吸附容量大、選擇性好、易于再生、成本低等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)及多肽的分離純化，尤其是組氨酸標(biāo)記蛋白質(zhì)的高效純化。
鎳Ni柱的原理是過渡金屬通過與電子供體配基上，能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負(fù)性元素（O，N），形成較穩(wěn)定的金屬螯合物。在IMAC中，一個(gè)Ni2+有六個(gè)配位位點(diǎn)，被含有3、4或5個(gè)電子供體基團(tuán)（配位位點(diǎn)）的螯合物固定在吸附劑上，而剩下未被占據(jù)的位點(diǎn)暴露于溶液中，能與組氨酸，半胱氨酸，和色氨酸的側(cè)鏈或組氨酸標(biāo)簽的蛋白特異性結(jié)合。
鎳Ni柱L00666的使用：
鎳Ni柱的洗脫通常采用競(jìng)爭(zhēng)洗脫，先用低濃度的咪唑?qū)㈦s蛋白和結(jié)合不牢的蛋白洗去，再用合適的濃度將目的蛋白洗脫。洗脫的先后順序與蛋白的結(jié)合能力相關(guān)。
另外，在鎳Ni柱的使用中，應(yīng)當(dāng)避免緩沖液中存在還原劑和螯合劑，以免Ni2+被還原而脫落。如果柱料使用太久積累了很多雜蛋白，可用EDTA將Ni2+螯合下來，再用NaOH清洗柱料后，重新螯合Ni離子，即可完成再生。鎳Ni柱L00666不用時(shí)，應(yīng)保存在20%乙醇中防止長(zhǎng)菌。
