eBlot L1快速濕轉儀是用來轉印蛋白的儀器,電泳轉印為轉移蛋白常用的方法,該技術有效、迅速,并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉印分離的蛋白質的過程,即是電泳轉印法。
因為此技術往膜上轉印蛋白GX、快速和準確,并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率,在轉移印跡技術中得到廣泛的應用。
eBlot L1快速濕轉儀準備工作:
1、準備對緩沖液進行轉移,緩沖液的pH值.不要無故調整,如果儀器過熱出錯,那么可能選擇了不適合的緩沖液。
2、通電以后,凝膠在轉移緩沖液中平衡,平衡能夠將電泳緩沖液中的鹽和清潔劑從凝膠中除去。若不將鹽去除,將對緩沖液產生很大的影響,并且使得儀器在轉移過程中過熱。
除此以外,在緩沖液中,低濃度的凝膠(<12%的聚丙烯酰胺)會縮水,平衡調整凝膠為電泳轉移提供便利。凝膠的濃度決定了平衡所需時間。
3、以凝膠為依據(jù)將適宜大小的膜剪裁出來,在緩沖液中通過45度夾角緩慢滑入膜,并且浸泡15-30分鐘,從而濕潤*,不然的話,那么會容易起對轉移起到阻滯作用的氣泡。應當使用鑷子或者帶手套來避免污染膜。
4、以凝膠為依據(jù)將適宜大小的膜剪裁出來,2張加厚型濾紙或4張厚濾紙或6張薄濾紙被需要,將濾紙在轉移緩沖液中浸透*。
5、若一次轉膜多張,使用透析膜隔開,也應當*浸透透析膜。
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